大鼠抗卵清蛋白 IgG3 抗体（OVAlgG3）检测试剂盒操作攻略

产品简介：

  

  样本来历一般为大鼠血清、血浆或细胞培养上清等。若搜集血清，需运用无菌注射器或采血针从大鼠体内抽取血液，放入无菌离心管中，静置 30 分钟至 1 小时，待血液凝结后，以 3000rpm 左右的转速离心 10 - 15 分钟，当心汲取上层血清至新的无菌管中。血浆样本则需在采血时参加适量抗凝剂，如肝素钠或 EDTA，采血后当即倒置混匀，随后相同以适宜转速离心获取血浆。细胞培养上清在搜集时要保证无细胞污染，可经过低速离心去除细胞碎片，搜集上清液。

  取出试剂盒中的浓缩洗刷缓冲液，依照说明书指定的稀释份额，一般为 1:20 - 1:30（例如，若浓缩液为 10mL，参加 190 - 290mL 蒸馏水或去离子水），缓慢参加稀释用水，边加边悄悄拌和或倒置混匀，保证充沛混合均匀，制造好的洗刷缓冲液应置于室温备用，且主张当天制造当天运用，避免繁殖细菌影响洗刷作用。

  初度孵育完毕后，当心取出微孔板，揭开封板膜，将微孔板倒置在洁净的吸水纸上，悄悄敲打，尽量排空孔内液体。随后向每孔参加预先制造好的洗刷缓冲液，每孔加 300μL 左右（依说明书精确量），浸泡 1 - 2 分钟后，再次倒置微孔板，甩掉洗刷液，如此重复洗刷 3 - 5 次，务必将孔内未结合的物质清洗洁净，最终一次洗刷后，可将微孔板倒置在吸水纸上顷刻，吸干残留的洗刷液。

  二次孵育完成后，再次重复洗刷过程，彻底清除未结合的二抗。接着参加显色底物溶液，一般每孔加 100μL，悄悄振动微孔板，使底物溶液均匀分布于各孔。将微孔板置于室温下避光显色，亲近调查色彩改变，显色时刻一般在 10 - 30 分钟之间，详细时长取决于样本中抗体含量及显色反响的强度。当看到规范品孔呈现十分显着的色彩梯度改变且样本孔色彩改变趋于稳定时，即可预备停止反响。

  依据酶标仪读取的规范品各浓度梯度的吸光度值，使用专业绘图软件或作业软件（如 Excel）制作规范曲线，一般会用四参数拟合曲线法，以规范品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标。然后将样本孔的吸光度值代入规范曲线方程，计算出样本中大鼠抗卵清蛋白 IgG3 抗体的含量。在剖析成果时，要最大极限地考虑试验差错、样本稀释倍数等要素，对成果的可靠性做归纳评价，若发现异常成果，可考虑重复试验进行验证。

  经过谨慎遵从以上操作过程，您便能娴熟运用优品生物的大鼠抗卵清蛋白 IgG3 抗体检测试剂盒，精确获取试验数据，为您的科研、出产等相关作业供给有力支撑。

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